ВЛИЯНИЕ ХЛОРАМФЕНИКОЛА И БИОФЕНИКОЛЯ НА ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ ПАРАМЕТРЫ ГЕМОЛИЗАТА КРОВИ ПРИ ОСТРОЙ СВИНЦОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

Укрепление и охрана здоровья трудоспособного населения страны является основной задачей медицины, которая обеспечивает экономическую стабильность общества. Охрана здоровья работников промышленных предприятий и разработка комплекса эффективных мер по профилактике и лечению профессиональных болезней относится к одной из актуальных проблем современного здравоохранения.

В основном, причиной возникновения таких заболеваний являются вредные факторы производственной среды.

Одно из ведущих мест по загрязнению окружающей среды химическими веществами занимает свинцовое производство.

Полиорганность поражений при свинцовой интоксикации в последние годы привлекла внимание исследователей к изучению роли свободнорадикального окисления липидов. В эксперименте убедительно доказана роль активации перекисного окисления липидов и подавление ферментов антиоксидантной системы в патогенезе свинцовой интоксикации [1, с.60].

Также следует отметить, что при лечении дисфункции желудочно-кишечного тракта, возникающего на фоне свинцовой интоксикации, применяется препарат хлорамфеникол. Однако данный препарат, как и свинец, токсически влияет на систему крови. Поэтому применение хлорамфеникола на фоне свинцовой интоксикации может привести к глубокому угнетению функции клеток крови.

Следовательно, для лечения свинцовой интоксикации необходимы препараты, не имеющие побочных эффектов, желательно растительного происхождения.

В связи с этим, более глубокое изучение механизма токсического влияния свинца на организм, получение новых препаратов из лекарственных растений, предотвращающих повреждение клеток, и лечение свинцовой интоксикации этими препаратами являются актуальными на данный момент, что и определило выбор темы.

Целью работы является изучение влияния хлорамфеникола и биофениколя на хемилюминесцентные параметры гемолизата крови при острой фосфорной интоксикации.

Материалы и методы исследования.

Работа выполнена на кафедре нормальной и патологической физиологии Южно-Казахстанской государственной фармацевтической академии.

Исследования проводились на 210 крысах-самцах с исходной массой тела 150-180 г.

Экспериментальная острая свинцовая интоксикация (ОСИ) была произведена путем однократного внутрибрюшинного введения 5%-го раствора ацетата свинца в дозе 100 мг/кг массы тела животных. Регистрация анализируемых показателей производилась на 4-е, 8-е и 11-е сутки наблюдения.

Животные были разделены на следующие группы:

- 1 группа – контрольная;

- 2 группа – экспериментальная с ОСИ;

-3 группа – экспериментальная группа с ОСИ, получавшая хлорамфеникол в дозе 100 мг/кг массы в течение 7 дней интрагастрально;

- 4 группа – экспериментальная группа с ОСИ, получавшая биофениколь в дозе 120 мг/кг массы в течение 7 дней интрагастрально;

Объектом исследования явилась кровь (эритроциты и плазма) экспериментальных животных.

Определение хемилюминесцентных свойств гемолизата крови.

По мнению А.И. Журавлева [2, с. 3], хемилюминесцентный метод является объективным показателем протекания свободнорадикальных окислительных процессов и активности биоантиокислительных систем организма. Изменение параметров хемилюминесценции биологических сред организма дает возможность количественно описать кинетику свободнорадикальных реакций, что трудно сделать другими методами. Для измерения хемилюминесценции одной пробы требуется 10-20 минут, что также определило выбор метода [3].

Для анализа утром натощак общепринятым способом забирали кровь в объеме не менее 1,1 мл в каждую из двух пробирок, центрифугировали при скорости 3000 об/мин в течение 10 минут. Затем из каждой пробирки извлекали по 1 мл надосадочной жидкости и переносили в специальные полиэтиленовые кюветы.

Исследование свечения проводили на аппарате «Хемилюминометр ХЛМЦ-01». В качестве детектора сверхслабого свечения использовался новый фотоэлектронный умножитель ФЭУ-130 (тип «квантон» Англия), обладающей чувствительностью от 300 до 650 нм.

На первом этапе определяли спонтанное свечение гемолизата, а затем и интенсивность хемилюминесценции, индуцированной с помощью перекиси водорода. Для этого через специальный ввод в кювету добавляли по 0,5 мл 3% раствора перекиси водорода. После этого наблюдалась характерная кинетика свечения, регистрируемая с помощью КСП-4. Температура среды в ходе опыта поддерживалась на уровне 37⁰С. Основными характеристиками изучаемого процесса хемилюминесценции служили параметры интенсивности спонтанного и индуцированного свечения. Также определяли среднюю скорость образования перекисных радикалов (ССОПР). Полученные результаты выражали в кв/сек для спонтанного свечения и тыс.кв/5 мин (общая светосумма) – для индуцированного.

Результаты собственного исследования.

Для изучения хемилюминесцентных параметров гемолизата крови однократно внутрибрюшинно вводилось 5 % раствор ацетата свинца в дозе 100 мг/кг массы в течение 11 суток.

Были изучены следующие параметры хемолюминесценции гемолизата крови при ОСИ: спонтанное свечение, свечение, инициированное при применении 0,5 мл 3-%-й перекиси водорода, ССОПР и хемилюминесцентный показатель интоксикации (ХЛПИ).

При острой интоксикации свинцом хемилюминесцентные свойства гемолизата крови на 4-е сутки исследования повысились на 61,5%, инициированное свечение при применении 0,5 мл 3-%-й перекиси водорода увеличилось на 57,6%, а ССОПР – на 58,2% по сравнению с контрольной группой.

Максимальное увеличение хемилюминесцентных параметров гемолизата крови установлено на 8-е сутки исследования, при этом спонтанное, иницированное свечение и ССОПР увеличиваются на 126,9%, 139,1% и 140,1%. На 11-е сутки исследования отмечается некоторое снижение параметров хемилюминесценции по сравнению с предыдущим сроком и параметры сверхслабого свечения приближаются к показателям интактных животных. По тем же закономерностям изменяется и ХЛПИ.

Итак, хемилюминесцентным методом нам удалось установить значительное повышение активности спонтанного и иницированного с помощью перекиси водорода свечения, а также резкое ускорение образования перекисных радикалов в жидкой части крови у животных при острой интоксикации свинцом, что свидетельствует о повышении активности ПОЛ в течение 11 суток, с максимальным подъемом на 8-е сутки исследования.

В своем исследовании мы попытались изучить в сравнительном аспекте действие хлорамфеникола и биофениколя на систему крови при свинцовой интоксикации, так как в состав биофениколя помимо хлорамфеникола входит компонент корня солодки – глицирризиновая кислота.

Было исследовано сравнительное влияние хлорамфеникола и биофениколя на хемилюминесцентные свойства гемолизата крови при ОСИ.

Полученные во время эксперимента данные представлены в таблице.

Как видно из таблицы, при введении 5% р-ра ацетата свинца однократно в дозе 100 мг/кг массы хемилюминесцентные свойства гемолизата крови повышаются, в частности уровень спонтанного свечения увеличился на 126,9%, инициированное свечение гемолизата крови при применении 0,5 мл 3-%-й перекиси водорода – на 139,1%, а ССОПР – на 140,1%, а ХЛПИ – на 130% по сравнению с контрольной группой.

Введение хлорамфеникола интрагастрально в дозе 100 мг/кг массы в течение 7 дней резко активизирует хемилюминесцентые свойства гемолизата крови, об этом свидетельствует повышение спонтанного свечения на 263,1% по сравнению с интактной группой и на 60% по сравнению с группой с ОСИ.

Таблица – Динамика хемилюминесцентных свойств гемолизата крови при ОСИ под влиянием хлорамфеникола и биофениколя

Инициированное свечение гемолизата крови под влиянием хлорамфеникола увеличилось на 286,5% по сравнению с интактной группой и на 61,6% по сравнению со «свинцовой» группой. Аналогичное изменение имеет место при определении ССОПР. О токсическом действии хлорамфеникола при свинцовой интоксикации свидетельствует увеличение ХЛПИ: повышение его составляло 264% по сравнению с интактной группой и 58,3% по сравнению с группой со свинцовой интоксикацией.

Введение на фоне свинцовой интоксикации биофениколя в дозе 120 мг/кг массы в течение 7 дней снижает параметры хемилюминесценции гемолизата крови по сравнению с нелеченой группой и группой, получившей хлорамфеникол. Спонтанное свечение снизилось по сравнению с нелеченой группой на 50,9% и на 69,3% по сравнению с группой, получившей хлорамфеникол.

Под влиянием биофениколя инициированное свечение гемолизата крови уменьшилось на 54,9% по сравнению с нелеченой группой и на 72,1% по сравнению с группой, получившей хлорамфеникол. Такие же изменения имеют место по отношению к ССОПР гемолизата крови. Как видно из рисунка 3, при введении биофениколя ХЛПИ гемолизата крови снизился по сравнению с нелеченной группой на 52,2% и на 69,8% по сравнению с группой, получившей хлорамфеникол.

Проведенные исследования показали, что при введении хлорамфеникола и биофениколя на фоне свинцовой интоксикации происходят разнонаправленные изменения, в частности под влиянием хлорамфеникола активизируются хемилюминесцентные параметры гемолизата крови, а под влиянием биофениколя, наоборот, снижаются.

Литература:

1. Даирбеков О.Д., Жумабаев У.А. Состояние энзимной антиоксидантной системы крови у рабочих свинцового завода / О.Д. Даирбеков, У.А. Жумабаев //Вопросы морфологии и клиники. – Алматы, 2006. – Вып. 19. – С. 60-63.

2. Журавлев А.И. Развитие идей Тарусова Б.Н. о роли цепных процессов в биологии /А.И. Журавлев //В кн.: Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. – М.: Наука, 1982. – С. 3-36.

3. Фархутдинов Р.Р., Лиховских В.А. Хемилюминесцентные методы исследования свободнорадикального окисления в биологии и медицине: уч.-метод. пособие / Р.Р. Фархутдинов, В.А. Лиховских. – УФА: БГМИ, 1995. – 110 с.